氧化氮消融冷冻消融治疗前列腺癌导致勃起功能障碍动物实验

摘要:目的勃起功能障碍(erectile dyunction, ED)是前列腺癌(prostate cancer)冷冻消融治疗(cryoablation, Cryo)后最常见并发症之一。本探讨旨在通过分析Cryo前后勃起功能和一氧化氮合酶(NOS)表达量的变化,初步研究神经血管束(Neurovascular bundle, NVB)冷冻性损伤对ED的影响,以分子水平研究前列腺癌冷冻消融导致ED的机制。办法和材料选择雄性成年SD大鼠80只,随机分为对照组、实验组A、实验组B、实验组C。实验组A、实验组B、实验组C分别采取Endocare公司氩氦冷冻体系直径1.7mm冷冻器直视下冷冻大鼠前列腺周围的双侧NVB,温度分别制约在0℃、-40。C、-80℃;对照组只将冷冻器贴近双侧NVB,不开启冷冻体系。各组分别于Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周随机选取5只实验大鼠行阿扑(APO)试验,观察勃起功能的变化;处死后取大鼠新鲜的海绵体组织行RT-PCR,检测nNOS-mRNA、eNOS-mRNA的相对表达量,分析各组大鼠NOS的变化走势;取大鼠固定的海绵体组织行免疫组化,分析nNOS和eNOS的IOD值。结果1对照组、实验组A勃起次数在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无明显差别(P0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均明显减少(P0.001)。2实验组A勃起次数在Cryo前、Cryo后第2周、来源小学教学第4周、第9周与对照组均无显著差别(P0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较对照组明显减少(P0.001);实验组C在第4周时勃起次数明显低于实验组B (0.2±0.45Vs.2.0±1.58, P=0.040)。3对照组、实验组A海绵体nNOS-mRNA相对表达量在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无明显差别(P0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均明显降低(P0.001)。4实验组A海绵体nNOS-mRNA相对表达量在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无显著差别(P0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较对照组明显降低(P0.001);实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周时均明显低于实验组B(P0.001)。5对照组、实验组A海绵体eNOS-mRNA相对表达量在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无明显差别(P0.05);与Cryo前相比,实验组B在第4周(1.10±0.078Vs.1.25±0.089,P=0.028)、第9周(0.77±0.050Vs.1.25±0.089,P0.001)时明显降低;实验组C在第9周较Cryo前明显降低(0.84±0.073Vs.1.19±0.035, P0.001)。6实验组A海绵体eNOS-mRNA相对表达量在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无显著差别(P0.05);实验组B、实验组C在第9周时较对照组明显降低(P0.001)。7对照组、实验组A海绵体nNOS IOD值在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无明显差别(P0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均明显降低(P0.001);实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周均显著低于实验组B(P0.001)。8实验组A海绵体nNOS IOD值在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无显著差别(P0.05);实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较对照组明显降低(P0.001)。9对照组、实验组A海绵体eNOS IOD在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无明显差别(P0.05);与Cryo前相比,实验组B在第4周(7.17±0.280Vs.7.93±0.122,P=0.002)、第9周(5.03±0.142Vs.7.93±0.122,P0.001)时较Cryo前均明显降低;实验组C在第9周较Cryo前明显降低(4.90±0.629Vs.7.82±0.317,P0.001)。10实验组A海绵体eNOS IOD在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无显著差别(P0.05);与对照组相比,第9周时实验组B、实验组C明显降低(P0.001)。结论1.NVB冷冻损伤是前列腺癌Cryo治疗导致ED的发生机制,且勃起功能随着时间会有所恢复;2.NOS表达量的变化是前列腺癌Cryo治疗导致ED的分子基础;3.冷冻温度是影响前列腺癌Cryo后ED的重要因素,温度越高越有利于勃起功能的恢复。关键词:冷冻消融术论文神经血管束论文勃起功能障碍论文一氧化氮合酶论文前列腺癌论文

    中文摘要4-7

    Abstract7-11

    缩略语/符号说明11-12

    前言12-17

    探讨近况及成果12-16

    探讨目的和办法16-17

    材料和办法17-24

    1.1 实验材料、对象和分组17-19

    1.1.1 主要仪器设备17

    1.1.2 主要试剂和药物17-18

    1.1.3 实验动物18

    1.1.4 实验分组18-19

    1.2 实验操作19-23

    1.2.1 麻醉及暴露NVB19

    1.2.2 双侧NVB的Cryo19

    1.2.3 药物诱导勃起19

    1.2.4 获取组织19-20

    1.2.5 半定量RT-PCR分析20-21

    1.2.6 石蜡切片及免疫组化21-23

    1.3 统计学处理23-24

    结果24-38

    2.1 Cryo前后勃起次数的变化24-26

    2.2 RT-PCR分析26-31

    2.2.1 Cryo前后nNOS-mRNA的相对表达量的变化26-29

    2.2.2 Cryo前后eNOS-mRNA的相对表达量的变化29-31

    2.3 免疫组化31-38

    2.3.1 Cryo前后nNOS表达的变化31-35

    2.3.2 Cryo前后eNOS表达的变化35-38

    讨论38-45

    结论45-46

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