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简析脊索姜黄姜黄素提高顺铂对脊索瘤细胞系CM-319化疗敏感性初步

最后修改时间：2024-03-15 收藏本文 点赞:8326 浏览:23906 作者：用户投稿原创标记本站原创
摘要：目的观察姜黄素对人脊索瘤细胞系CM-319顺铂化疗的敏感性，并研究其可能的意义机制。办法体外培养脊索瘤细胞系CM-319，并根据不同的实验目的分为4组：（1）空白对照组（仅给予0.1%DMSO）；（2）顺铂组（0～40mg/L）；（3）姜黄素组（0～40μmol/L）；（4）顺铂+姜黄素组。根据不同的探讨目的孵育24h，乳酸脱氢酶实验筛选顺铂和姜黄素的最大意义浓度。WST-8法检测CM-319细胞的增殖状况；流式细胞术检测细胞周期的转变从及凋亡；实时定量PCR检测MDR1和MRP1mRNA的表达，Western blot检测细胞核内HIF-1α和胞浆中P-gp、MRP1蛋白表达。结果1.乳酸脱氢酶释放实验显示，0～30mg/L顺铂对CM-319细胞LDH漏出率无显著影响（P0.05）。30mg/L顺铂联合不同浓度姜黄素共孵育CM-319细胞24h，姜黄素最大联合剂量为30μmol/L。2. WST-8结果显示：30μmol/L姜黄素本身对CM-319细胞具有一定的生长抑制意义，虽然顺铂也能在一定程度上抑制CM-319细胞的生长，但抑制率较低。而两者联合后，CM-319细胞增殖显著降低。3.实时定量PCR结果显示，CM-319中MDR1几乎不表达，且姜黄素和（或）顺铂并不影响其表达。MRP1在CM-319细胞中表达较高，姜黄素单独意义后能降低其mRNA水平，顺铂单独意义24h对其mRNA水平无显著转变。而两者联合后，两者同时意义是能使MRP1mRNA水平降低。4. Western blot显示，CM-319细胞中MDR1的编码产物P-gp表达很低。相比之下，MRP1表达较高。HIF-1α在细胞核中呈一定的表达。姜黄素能在一定程度上降低胞内MRP1蛋白含量，同时也能降低胞核中HIF-1α的含量。顺铂对胞内MRP1蛋白含量及胞核中HIF-1α的含量无显著的影响，当姜黄素和顺铂联合利用后，MRP1和HIF-1α表达水平可见降低。5.流式细胞术检测结果显示对照组细胞S期所占分数为22.65%，G1期54.30%，G2期23.05%，凋亡率为2.91%。姜黄素联合顺铂意义细胞后S期所占分数分为5.47%，G1期占87.23%，G2期为7.34%，凋亡率为更多应用语言25.28%。结论姜黄素能增多CM-319细胞对顺铂抑制的敏感性，以而发挥对人脊索瘤细胞的生长抑制意义。关键词：姜黄素论文顺铂论文凋亡论文脊索瘤论文MRP1论文

    主要英文缩略语索引4-5

    中文摘要5-7

    ABSTRACT7-9

    前言9-12

    实验材料12-14

    实验办法及步骤14-24

    结果24-30

    讨论30-33

    结论33-34

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